يعتمد التشخيص المختبري لجميع الأمراض المعدية تقريبًا على اكتشاف الأجسام المضادة في دم المريض ، والتي يتم إنتاجها ضد مستضدات الممرض ، من خلال طرق التفاعلات المصلية. دخلوا الممارسة الطبية من أواخر القرن التاسع عشر إلى أوائل القرن العشرين.
ساعد تطور العلم في تحديد التركيب المستضدي للميكروبات والصيغ الكيميائية لسمومها. هذا جعل من الممكن ليس فقط إنشاء مصل علاجي ، ولكن أيضًا تشخيصي. يتم الحصول عليها عن طريق إعطاء مسببات الأمراض الموهنة لحيوانات المختبر. بعد عدة أيام من التعرض ، يتم استخدام دم الأرانب أو الفئران لتحضير المستحضرات المستخدمة للتعرف على الميكروبات أو سمومها باستخدام الاختبارات المصلية.
المظهر الخارجي لمثل هذا التفاعل يعتمد على ظروف وضعه وعلى حالة المستضدات في دم المريض. إذا كانت الجزيئات الميكروبية غير قابلة للذوبان ، فإنها تترسب ، أو تتحلل ، أو ترتبط أو تثبّت في المصل. إذا كانت المستضدات قابلة للذوبان ، تظهر ظاهرة التعادل أو الترسيب.
تفاعل التراص (RA)
اختبار التراص المصلي محدد للغاية. إنه سهل الأداء وهادئبصري ، لتحديد وجود المستضدات في مصل دم المريض بسرعة. يتم استخدامه لاختبار رد فعل فيدال (تشخيص حمى التيفود وحمى نظيرة التيفوئيد) و Weigl (حمى التيفوئيد).
يعتمد على تفاعل محدد بين الأجسام المضادة البشرية (أو agglutinins) والخلايا الميكروبية (agglutenogens). بعد تفاعلهم ، تتشكل الجسيمات التي تترسب. هذه علامة إيجابية. يمكن استخدام العوامل الميكروبية الحية أو المقتولة والفطريات والأوليات وخلايا الدم والخلايا الجسدية لإعداد التفاعل.
كيميائيًا ، ينقسم التفاعل إلى خطوتين:
- اتصال محدد للأجسام المضادة (AT) مع مولدات المضادات (AG).
- غير محدد - ترسيب تكتلات AG-AT ، أي تكوين التراص.
تفاعل التراص غير المباشر (IPHA)
رد الفعل هذا أكثر حساسية من السابق. يتم استخدامه لتشخيص الأمراض التي تسببها البكتيريا والطفيليات داخل الخلايا والأوليات. إنه محدد لدرجة أنه يمكن اكتشاف حتى التركيزات المنخفضة جدًا من الأجسام المضادة.
تستخدم كريات الدم الحمراء للأغنام المنقاة وخلايا الدم الحمراء البشرية المعالجة مسبقًا بالأجسام المضادة أو المستضدات لإنتاجها (اعتمادًا على ما يريد فني المختبر العثور عليه). في بعض الحالات ، يتم علاج خلايا الدم الحمراء البشرية بالغلوبولين المناعي. تعتبر التفاعلات المصلية لكريات الدم الحمراء قد حدثت إذا استقرت في قاع الأنبوب. عن رد فعل إيجابيقل عندما يتم ترتيب الخلايا في شكل مظلة مقلوبة ، تحتل القاع بأكمله. يتم حساب التفاعل السلبي إذا استقرت كريات الدم الحمراء في عمود أو على شكل زر في وسط القاع.
تفاعل الهطول (RP)
التفاعلات المصلية من هذا النوع تستخدم لاكتشاف الجزيئات الصغيرة للغاية من المستضدات. يمكن أن تكون ، على سبيل المثال ، بروتينات (أو أجزاء منها) ، ومركبات بروتينات تحتوي على دهون أو كربوهيدرات ، وأجزاء من البكتيريا ، وسمومها.
يتم الحصول على الأمصال للتفاعل عن طريق إصابة الحيوانات بشكل مصطنع ، عادة الأرانب. بهذه الطريقة ، يمكنك الحصول على أي مصل معجل. يشبه إعداد تفاعلات الترسيب المصلية في آلية عمل تفاعلات التراص. تتحد الأجسام المضادة الموجودة في المصل مع المستضدات في محلول غرواني ، مكونة جزيئات بروتينية كبيرة تترسب في قاع الأنبوب أو على الركيزة (الهلام). تعتبر هذه الطريقة محددة للغاية ويمكنها اكتشاف كميات ضئيلة من مادة ما.
يستخدم لتشخيص الطاعون والتولاريميا والجمرة الخبيثة والتهاب السحايا وأمراض أخرى. بالإضافة إلى ذلك ، يشارك في فحص الطب الشرعي.
تفاعل جل ترسيب
يمكن إجراء التفاعلات المصلية ليس فقط في وسط سائل ، ولكن أيضًا في هلام أجار. وهذا ما يسمى طريقة الترسيب المنتشر. بمساعدتها ، تتم دراسة تكوين مخاليط مستضدية معقدة. تعتمد هذه الطريقة على الانجذاب الكيميائي لمستضدات الأجسام المضادة والعكس صحيح. في هلام يتحركونتجاه بعضها البعض بسرعات مختلفة ، وتشكيل خطوط هطول الأمطار. كل سطر عبارة عن مجموعة واحدة من AG-AT.
تفاعل تحييد السموم الخارجية مع مضاد السموم (PH)
الأمصال المضادة للسموم قادرة على تحييد تأثير السموم الخارجية التي تنتجها الكائنات الحية الدقيقة. تستند هذه التفاعلات المصلية على هذا. يستخدم علم الأحياء الدقيقة هذه الطريقة لمعايرة الأمصال والسموم والذيفانات وتحديد نشاطها العلاجي. يتم تحديد قوة معادلة السموم من خلال الوحدات التقليدية - AE.
بالإضافة إلى ذلك ، بفضل هذا التفاعل ، من الممكن تحديد نوع أو نوع السموم الخارجية. يستخدم هذا في تشخيص مرض الكزاز والدفتيريا والتسمم الغذائي. يمكن إجراء الدراسة "على الزجاج" وفي الهلام.
تفاعل التحلل (RL)
المصل المناعي ، الذي يدخل جسم المريض ، بالإضافة إلى وظيفته الرئيسية المتمثلة في المناعة السلبية ، له أيضًا خصائص lysing. إنه قادر على إذابة العوامل الجرثومية والعناصر الخلوية الغريبة والفيروسات التي تدخل جسم المريض. اعتمادًا على خصوصية الأجسام المضادة الموجودة في المصل ، يتم عزل الجراثيم والسيتولايسينات والسبيروشيوليزين والهيموليزين وغيرها.
تسمى هذه الأجسام المضادة "مكمل". يوجد في جميع سوائل جسم الإنسان تقريبًا ، وله بنية بروتينية معقدة وحساسة للغاية لارتفاع درجة الحرارة والاهتزاز والأحماض وأشعة الشمس المباشرة. ولكن في الحالة الجافة يمكن الاحتفاظ بهاخصائصه lysing تصل إلى ستة أشهر.
هناك هذه الأنواع من التفاعلات المصلية من هذا النوع:
- انحلال الجراثيم ؛
- انحلال الدم.
يتم إجراء تفكيك الجراثيم باستخدام مصل دم المريض ومصل مناعي خاص بالميكروبات الحية. إذا كان هناك مكمل كافٍ في الدم ، فسوف يرى الباحث البكتريا ، وسيعتبر التفاعل إيجابيًا.
رد الفعل المصلي الثاني للدم هو أن تعليق خلايا الدم الحمراء للمريض يتم معالجته بمصل يحتوي على الهيموليزين ، والذي يتم تنشيطه فقط في وجود مجاملة معينة. إذا كان هناك واحد ، فسيراقب مساعد المختبر انحلال خلايا الدم الحمراء. يستخدم هذا التفاعل على نطاق واسع في الطب الحديث لتحديد العيار التكميلي (أي أقل كمية له تثير تحلل كرات الدم الحمراء) في مصل الدم ولإجراء تحليل لتثبيت المكمل. وبهذه الطريقة يتم إجراء اختبار مصلي لمرض الزهري - تفاعل واسرمان.
تفاعل تثبيت المكمل (CFR)
يستخدم هذا التفاعل لاكتشاف الأجسام المضادة لعامل معدي في مصل دم المريض ، وكذلك لتحديد العامل الممرض من خلال تركيبته المستضدية.
حتى هذه النقطة ، قمنا بوصف التفاعلات المصلية البسيطة. يعتبر RSK تفاعلًا معقدًا ، حيث لا يتفاعل فيه عنصران ، بل ثلاثة عناصر: الجسم المضاد ، والمستضد والمكمل. يكمن جوهرها في حقيقة أن التفاعل بين الجسم المضاد والمستضديحدث فقط في وجود البروتينات التكميلية ، والتي يتم امتصاصها على سطح مركب AG-AT المتشكل.
المستضدات نفسها ، بعد الإضافة التكميلية ، تخضع لتغييرات كبيرة ، والتي تظهر جودة التفاعل. يمكن أن يكون تحلل ، انحلال دم ، تجميد ، عمل مبيد للجراثيم أو جراثيم.
يحدث التفاعل نفسه على مرحلتين:
- تكوين مركب مضاد - مستضد غير مرئي للفاحص.
- تغيير في المستضد تحت تأثير المكمل. يمكن تتبع هذه المرحلة غالبًا بالعين المجردة. إذا لم يكن رد الفعل مرئيًا ، فسيتم استخدام نظام مؤشر إضافي لتحديد التغييرات.
نظام المؤشر
هذا التفاعل يعتمد على التثبيت التكميلي. تتم إضافة كريات الدم الحمراء المنقى والمصل الانحلالي الخالي من المكملات إلى أنبوب الاختبار بعد ساعة من ضبط RSC. إذا بقيت مكمل غير منضم في أنبوب الاختبار ، فسوف ينضم إلى مركب AG-AT المتكون بين خلايا دم الأغنام والهيموليسين ، ويسبب ذوبانها. هذا يعني أن RSK سلبي. إذا بقيت كريات الدم الحمراء سليمة ، فحينئذٍ يكون رد الفعل إيجابيًا.
اختبار التراص الدموي (RGA)
هناك نوعان من تفاعلات التراص الدموي مختلفة اختلافًا جوهريًا. واحد منهم هو مصل ، ويستخدم لتحديد فصائل الدم. في هذه الحالة ، تتفاعل خلايا الدم الحمراء مع الأجسام المضادة.
والثانيلا ينطبق التفاعل على المصل ، حيث تتفاعل خلايا الدم الحمراء مع الهيماجلوتينين الذي تنتجه الفيروسات. نظرًا لأن كل عامل ممرض يعمل فقط على كرات الدم الحمراء المحددة (دجاج ، لحم ضأن ، قرد) ، يمكن اعتبار هذا التفاعل محددًا للغاية.
يمكنك معرفة ما إذا كان التفاعل إيجابيًا أم سلبيًا من خلال موقع خلايا الدم في الجزء السفلي من أنبوب الاختبار. إذا كان نمطها يشبه المظلة المقلوبة ، فإن الفيروس المطلوب موجود في دم المريض. وإذا تشكلت جميع كريات الدم الحمراء مثل عمود العملة المعدنية ، فلا توجد مسببات الأمراض المرغوبة.
اختبار تثبيط التراص الدموي (HITA)
هذا رد فعل محدد للغاية يسمح لك بتحديد نوع أو نوع الفيروسات أو وجود أجسام مضادة معينة في مصل دم المريض.
يكمن جوهرها في حقيقة أن الأجسام المضادة المضافة إلى أنبوب الاختبار مع مادة الاختبار تمنع ترسب المستضدات على كريات الدم الحمراء ، وبالتالي توقف التراص الدموي. هذه علامة نوعية على وجود مستضدات معينة في الدم لفيروس معين.
تفاعل التألق المناعي (RIF)
يعتمد التفاعل على القدرة على اكتشاف مجمعات AG-AT بالمجهر الفلوري بعد معالجتها بأصباغ الفلوروكروم. هذه الطريقة سهلة التعامل ولا تتطلب عزل الثقافة النقية وتستغرق القليل من الوقت. لا غنى عنه للتشخيص السريع للأمراض المعدية
في الممارسة العملية ، تنقسم هذه التفاعلات المصلية إلى نوعين: مباشر وغير مباشر.
يتم إنتاج RIF المباشر منالمستضد ، الذي يتم معالجته مسبقًا بمصل الفلورسنت. والأمر غير المباشر هو أن الدواء يعالج أولاً بتشخيص تقليدي يحتوي على مستضدات للأجسام المضادة ذات الأهمية ، ثم يعاد تطبيق مصل الإنارة ، المخصص لبروتينات مركب AG-AT ، والخلايا الميكروبية تصبح مرئية تحت المجهر.
