وفقًا لإحصاءات منظمة الصحة العالمية ، على مدار الأربعين عامًا الماضية ، مات 25 مليون شخص بسبب الإيدز. الضرر الناجم عن هذه العدوى هائل. تبين أن معظم المصابين في إفريقيا ، حيث جاءت هذه العدوى. مع فيروس نقص المناعة البشرية ، يصبح تشخيص المرض ذا صلة بشكل خاص. صحيح ، لا توجد علاجات لفيروس نقص المناعة البشرية حتى الآن ، لكن العلاج المبكر يمكن أن يطيل حياة المريض ويحسن جودته.
تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية
يتم تحديد الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في مراحل مختلفة بالطرق التالية:
- ELISA - المقايسة المناعية الإنزيمية.
- لطخة غربية.
- PCR - تفاعل البلمرة المتسلسل.
- اختبارات سريعة.
تم تطوير طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل بواسطة عالم الكيمياء الحيوية الأمريكي كاري موليس ، الذي حصل على جائزة نوبل في عام 1983. تعتبر هذه الطريقة في الطب اليوم في تشخيص جميع الإصابات هي الطريقة الرائدة لدقتها ومحتواها المعلوماتي. فيروس نقص المناعة البشرية ليس استثناء في هذا الصدد.
جوهر التحليل
أي خلية حية تحتوي على RNA و DNA. هذه الأحماض النووية قادرة على النسخ الذاتي والتكاثر الذاتي. لكل إصابة ، شظايا الحمض النووي فريدة من نوعها. فيفي السوائل البيولوجية ، تنتشر شظايا الأحماض النووية. يتم التقاطها والتعرف عليها بواسطة معدات خاصة - المفاعل. هذا هو أساس الأسلوب. يحسب مساعد المختبر هذه الأجزاء. يتم رصد الفيروس القهقرى HIV من أجل RNA. حتى مع وجود نسخ واحدة من الجزيئات الفيروسية ، يمكن لـ PCR اكتشافها وعدّها.
غالبًا ما يستخدم الدم الوريدي كسائل الاختبار. ترتبط المكونات الخاصة للطريقة بجزيئات الفيروس وتجعلها قابلة للاكتشاف ، لأن الشظايا الموجودة تتضاعف.
في حالة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، يمكن الحصول على نتيجة وجود الفيروس قبل وقت طويل من ظهور العيادة. لذلك ، نظرًا لحساسيته العالية ، فإن تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) له قيمة تشخيصية عالية. إضافة ضخمة لـ PCR هي تعدد استخدامات الطريقة. فترة حضانة الإصابة بـ PCR ليست عقبة.
تكلفة البحث
طريقة PCR مكلفة للغاية. هذه واحدة من عيوبها الكبيرة. يتطلب أحدث المعدات ومساعد مختبر مؤهل تأهيلا عاليا. في ضوء ما سبق ، لا يتم إجراء تشخيص PCR في مستوطنات صغيرة. يمكنك إجراء الاختبار فقط في العيادات المتخصصة الكبيرة.
تكلفة اختبار الحمض النووي لفيروس نقص المناعة البشرية في عيادات موسكو تبدأ من 2800 روبل ، ويتم تحديد الحمل الفيروسي (الحمض النووي الريبي الفيروسي في البلازما) بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل - من 8800 روبل ، ومقاومة فيروس نقص المناعة البشرية لمثبطات الأنزيم البروتيني - من 16500 روبل. كما ترى ، فإن الأسعار مرتفعة للغاية. يمكن إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل مجانًا في العيادات العامة بموجب سياسة MHI. الأهمية،أن الإجراء يمكن أن يتم بشكل مجهول. في السجل ، يتلقى المريض رقمًا يمكنه من خلاله معرفة النتيجة. في المراكز الطبية الحديثة توجد حسابات شخصية للعملاء حيث سيتم إدخال هذه البيانات.
أهداف البحث
يتم وصف تشخيص PCR لفيروس نقص المناعة البشرية في مثل هذه الحالات:
- الكشف عن إصابة الطفل المولود لأم مريضة أو حاملة المرض لتحديد العدوى داخل الرحم.
- إذا أعطت ELISA نتائج مشكوك فيها (يساعد تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس نقص المناعة البشرية في هذه الحالة على إجراء التشخيص النهائي).
- الكشف عن المحتوى الكمي للفيروس في الجسم
- مع طعمة مناعية إيجابية ، يكمل كل منهما الآخر مع تفاعل البوليميراز المتسلسل.
- اختبار المتبرعين.
- للتشخيص المبكر لفيروس نقص المناعة البشرية
- لتحديد الفعالية والمقاومة لمضادات الفيروسات القهقرية
ميزة هذا التحليل هي أنه يمكن إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس نقص المناعة البشرية حتى للأطفال دون سن السنة.
لا يتم إجراء البحث في كثير من الأحيان للتشخيص الأولي ، ولكن بالفعل في طور العلاج. التشخيصات الأولية هي دراسات مصلية (تحدد مستوى الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية). إذا تكررت نتيجة إيجابية خاطئة ، فقد يكون هذا مع حمولة فيروسية منخفضة.
يقوم تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية عندما لا توجد أجسام مضادة له حتى الآن. طريقة ELISA في هذه الحالة لن تعطي إجابة.
وستكون تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس نقص المناعة البشرية إيجابية بالفعل. لكن أعراض هذه الفترة من فيروس نقص المناعة البشرية غير محددة. يتم علاج المريض لأول مرة لفترة طويلة وبلا جدوى من ARVI من قبل ممارس عام. يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية يعتمد فقط علىلم يتم وضع PCR ، فمن الضروري اجتياز اختبارات شاملة أخرى. غالبًا ما تكون طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) مساعدة للحالات الصعبة.
التحضير للتحليل
قبل تناول تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس نقص المناعة البشرية ، قبل الاختبار بيومين ، يجب عدم تناول الأطعمة الدهنية والكحول. من الأفضل أيضًا عدم الإجهاد عقليًا وجسديًا. إذا تم وصف مسار من التحفيز المناعي للمريض ، يتم إيقافه قبل أسبوعين من التحليل.
من الأفضل أخذ الدم في الصباح. يمكن أيضًا فحص سوائل الجسم البيولوجية الأخرى (الحيوانات المنوية ، الإفراز المهبلي) ، لكن الدم هو أفضل مادة. لا تستعمل اللعاب والعرق والبول والدموع لان محتوى الفيروس فيها ضئيل.
إيجابيات PCR لفيروس نقص المناعة البشرية
مزايا الطريقة هي الاحتمال الضئيل للغاية لنتيجة إيجابية خاطئة ، عالمية التفاعل لأي سوائل بيولوجية في الجسم. التحليل له نطاق واسع:
- يمكن استخدام سحب دم واحد لاكتشاف الإصابات المختلفة.
- التقنية ملحة والنتيجة جاهزة في اليوم التالي.
- الثقة بين 85 و 98٪
- يمكن تحديد وجود فيروس نقص المناعة البشرية بعد 10-14 يومًا من الإصابة (لا توجد أجسام مضادة في هذا الوقت حتى الآن).
- لا يوجد حد للعمر ، يمكن إجراؤه على الفور منذ الولادة.
سلبيات الطريقة
عيوب PCR كالتالي:
- تكلفة التحليل.
- تتطلب معدات طبية متطورة.
- يتطلب مساعد مختبر وطبيب مؤهل تأهيلا عاليا ،تحليل آخذ.
- رد الفعل حساس للغاية ، لذلك قد يكون الخطأ 20٪.
- قد ينتج عنه نتيجة إيجابية خاطئة إذا كان المريض يعاني من عمليات المناعة الذاتية ، والأورام ، والالتهابات المزمنة.
- النظافة الخاصة لمباني المختبر ضرورية ، لأن الفيروس يمكن أن يدخل في التحليل من الهواء. ثم ستكون النتيجة خاطئة
بالنسبة للمختبرات التي تجري تفاعل البوليميراز المتسلسل ، لتحسين جودة التشخيص ، تم تطوير تدابير صارمة خاصة وفقًا لنظام SanPiN للرقابة الداخلية. بالإضافة إلى ذلك ، يجب مراعاة جميع قواعد العمل بهذه التقنية:
- مطلوب لمتابعة المعلومات الموجودة على أنابيب الاختبار بدقة.
- قبل أخذ عينات الدم ، انظر مرة أخرى وتأكد من جدولة التحليل.
- يجب على الممرضة تسمية الأنابيب بشكل صحيح.
- يجب أن يقوم مساعد المختبر بتنفيذ جميع عمليات التلاعب بالمادة الحيوية بشكل صحيح من أجل منع انتقال التلوث.
- يجب أن يكون نظام الاختبار بجودة ممتازة
فقط في حالة استيفاء كل هذه الشروط ، يمكن أن يكون الخطأ في الإجابة حوالي 2٪ فقط من الحلقات.
مدة التحليل
يهتم الكثيرون بمدة استعداد PCR لفيروس نقص المناعة البشرية. لا يستغرق التشخيص أكثر من 8 ساعات. قد يتلقى المريض إجابة في اليوم التالي. يتم إجراء الاختبار السريع في غضون ساعتين.
موثوقية PCR
على الرغم من مزاياها العديدة ، إلا أن تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لا يعتبر طريقة تشخيصية مثالية. يتم الاتصال به في حالةالحاجة لاجراء فحوصات الكشف عن وجود فيروس نقص المناعة فى الجسم.
متى يتم أخذ الدم للتحليل؟
كم من الوقت يستغرق PCR لفيروس نقص المناعة البشرية؟ يمكن الحصول على نتيجة موثوقة بالفعل عند أخذ الدم بعد 4-4 أيام من الإصابة المزعومة. بعد أسبوعين ، ستكون موثوقية فيروس نقص المناعة البشرية 98 ٪ ، وبفترة 5 أيام - 80 ٪. سيكون وجود نتيجة سلبية في تفاعل البوليميراز المتسلسل لفيروس نقص المناعة البشرية موثوقًا به ، ولكن للحصول على نتيجة دقيقة تمامًا ، يتم إجراء ELISA أيضًا.
تحليل ELISA لن يكون فعالاً إلا إذا كانت هناك أجسام مضادة للفيروس ، هذه المرة يمكن أن تستغرق من 1-3 أشهر إلى ستة أشهر. نظرًا لأن ELISA يعطي احتمالية أعلى (98٪ -99.9٪) ، لا يمكن تسمية PCR باختبار تأكيد بنسبة 100٪ لوجود عدوى HIV. لكن من ناحية أخرى ، هذه هي التقنية الوحيدة التي لا تحتاج فيها إلى انتظار ظهور الأجسام المضادة.
مع فيروس نقص المناعة البشرية ، يمكن أن يوفر تفاعل البوليميراز المتسلسل معلومات حول فعالية العلاج المضاد للفيروسات القهقرية ، ومرحلة مرض فيروس نقص المناعة البشرية وعدد VNs (تقييم كمي لوجود فيروس نقص المناعة البشرية في الجسم). هذا سوف يتحدث عن خطورة ومدى التغيير.
اختبار PCR لفيروس نقص المناعة البشرية ضروري أيضًا إذا كانت هناك أجسام مضادة في الدم ، لكن وجودها لا يشير إلى موثوقية الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية سريريًا.
تم اختبارهم ليس فقط للعدوى والجنس العرضي. مناسبات أخرى:
- التخطيط للحمل.
- العملية القادمة
- الجنس العرضي
- تتطلب بعض المهن هذا الاختبار للقبول في العمل (المعلمين والأطباء وغيرهم من العاملين في المجال الطبي).
- سجناء
- مرضى السل.
- موظفو وزارة الطوارئ والشرطة
- عاد من إجازة من دول غريبة (إذا كنت تريد التأكد من عدم وجود عدوى).
- بغايا.
- الطلاب الأجانب.
- المخدرات.
أيضًا ، قد تؤدي بعض الأعراض لدى المريض إلى إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية:
- فقدان الوزن المفاجئ.
- استمرار الإسهال لأكثر من 3 أسابيع
- ارتفاع غير معقول في درجة الحرارة لفترة طويلة.
- تورم العقد الليمفاوية.
- سبب غير مفسر للالتهاب الرئوي وداء المبيضات وما إلى ذلك.
فك تشفير التحليل من اختصاص الطبيب المعالج ، وليس مساعد المختبر.
PCR أم ELISA ، أيهما أفضل؟
عندما يتم الكشف عن تشخيص الـ PCR لفيروس HIV RNA نوعيًا وكميًا. يحدد هذا التحليل بوضوح عامل ممرض معين حتى لو كان هناك العديد من مسببات الأمراض المتفاعلة. يمكن استخدام المواد البيولوجية حتى في صورة جافة. الجانب السلبي هو الحساسية العالية لـ PCR ، عندما يمكن إعطاء نتيجة إيجابية خاطئة من خلال وجود كمية ضئيلة من الحمض النووي الغريب على الأدوات أو أنبوب الاختبار.
مهمة وإمكانية ELISA هي تحديد وجود الأجسام المضادة للفيروس القهقري. على الرغم من دقتها بنسبة 99٪ ، إلا أنها غير قابلة للتطبيق في المراحل المبكرة.
اختبار فيروس نقص المناعة البشرية النوعي
جودة عالية PCR لفيروس نقص المناعة البشرية يحدد وجود الفيروس في الجسم. ستبدو النتائج في هذه الحالة كما يلي: إيجابية ، إيجابية كاذبة ، سلبية. لكن هذه الدراسة لن تقدم معلومات حول كمية الفيروسات القهقرية. مثل هذا التحليل النوعيغير مناسب عندما يكون قد تم بالفعل الكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في الجسم بوسائل أخرى.
من المستحيل التحكم في فعالية العلاج بجودة تفاعل البوليميراز المتسلسل
تقدير فيروس نقص المناعة البشرية
يتم إجراؤها فقط بواسطة الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية من أجل حساب عدد نسخ الحمض النووي الريبي للفيروس في منتج بيولوجي.
الغرض من هذه الدراسة هو مراقبة العلاج المستمر والتعرف على مقاومة الفيروس له. لا يتم وصف العلاج المضاد للفيروسات في مثل هذه الحسابات بشكل أعمى من قبل الطبيب ، لذلك سيكون أكثر فعالية. يتم إجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي لعدوى فيروس العوز المناعي البشري في كثير من الأحيان. يتم عرض هذا التحليل كنسخة / مل من الدم.
ما هي النتائج التي يمكن إعطاؤها:
- Virus RNA غائب أو صغير جدًا (حوالي 20 نسخة / مل). لا يقين من التشخيص.
- من 20 - إلى 10 إلى 6 نسخ من الدرجة / مل - التشخيص موثوق.
- أكثر من 106 نسخة / مل - ارتفاع VN.
يمكن للمختبرات إجراء اختبار PCR في الوقت الحقيقي لفيروس نقص المناعة البشرية. هذا يعني الملاحظة والتقييم العددي لتراكم منتجات PCR مع التسجيل التلقائي للنتائج.
