طريقة القياس اللوني - تحليل يعتمد على مقارنة تشبع اللون للمواد التي تم فحصها والمعروفة. تعتبر نتائج الاختبارات الفيزيائية والكيميائية ذات قيمة كبيرة للعديد من فروع العلم ، لكن الأهم من ذلك كله هو أن البحث يستخدم في الطب.
جوهر طريقة القياس اللوني
هناك أنواع عديدة من الاختبارات التي تحدد التركيب الكيميائي للمواد. بعضها عالمي ويستخدم على نطاق واسع في مختلف المجالات ، والبعض الآخر محدد وبدقة أعلى. الطريقة اللونية عالمية.
يكمن جوهر التحليل في حقيقة أن تشبع لون محلول بتركيز غير معروف يُقارن بلون محلول قياسي. أثناء التحليل ، نتيجة لتفاعل المكون الذي تم فحصه مع كاشف معين ، يتم تكوين مركب ملون. بعد الانتهاء من التفاعل ، تتم مقارنة الظل الناتج مع لون المحاليل ، والتي يكون تركيزها معروفًا بالفعل.
يُعتقد أن مؤسس قياس الألوان هو روبرت بويل. استخدم الضغطالعفص لتمييز الحديد عن النحاس في المحلول. كان بويل هو الذي لاحظ أنه كلما زاد تركيز الحديد في المحلول ، زادت نغمة الأخير.
قياس الألوان
قياس الألوان هي طريقة لتحديد كمية المادة في المحاليل. يعتمد التحليل على قانون Bouguer-Lambert-Beer: عندما يصطدم شعاع ضوئي بطبقة امتصاص كثيفة من مادة ما ، تضعف شدتها.
يمكن أن تستخدم الطريقة اللونية لتحديد تركيز مادة ما مقارنة بصرية أو مقارنة باستخدام أدوات خاصة لقياس كثافة اللون. المقارنة تتم بشكل مباشر وتعويضي
- مستقيم. تتضمن الطريقة مقارنة مستوى لون محلول الاختبار عند كثافة ودرجة حرارة معينة للسائل بمحلول مرجعي. عند استخدام مقاييس ضوئية ومقاييس طيفية ، يتم استخدام الماء المقطر كحل مرجعي. الاجهزة تقيس شدة التيار والتي تعتمد على شدة الضوء
- تعويضية. تعتمد الطريقة على إحضار لون العينة المدروسة إلى العينة المرجعية. تتحقق النتيجة بإضافة مذيب أو زيادة ارتفاع طبقة الوسط الملطخ.
يؤدي استخدام مقياس الطيف الضوئي ، أحادي اللون وأدوات الدقة الأخرى إلى تبسيط طريقة البحث البسيطة بالفعل ويسمح لك بزيادة دقة النتائج. هذه الأجهزة قادرة على قياس مقدار انتقال الضوء وتحديد الطول الموجي.
أين يتم تطبيق التحليل
يتم استخدام طريقة القياس اللوني للتحليل عند معرفة التركيب الكيميائي الدقيق ، وهناك عينة مرجعية للمقارنة ، ودرجة حرارة الاختبار والعينة المرجعية هي نفسها. إذا كنت بحاجة إلى تحديد كمية مادة ملونة بسرعة ، لكنها صغيرة جدًا بحيث يستحيل تطبيق الطريقة التحليلية.
يستخدم مقياس الألوان على نطاق واسع في الطب لأبحاث الكيمياء الحيوية السريرية ومجالات أخرى:
- صناعة الأدوية ؛
- صناعة المواد الغذائية والكحول ؛
- علم الزراعة (تحديد جودة التربة).
إيجابيات وسلبيات
طريقة القياس اللوني ، مثل أي طريقة أخرى ، لها إيجابيات وسلبيات
تشمل المزايا ما يلي:
- سهولة التحليل ، الحد الأدنى من الإجراءات التحضيرية ؛
- إمكانية الاختبار حتى مع كمية صغيرة من مادة الاختبار ؛
- ليست هناك حاجة لمعدات باهظة الثمن ، على الرغم من تزايد استخدام الأجهزة الحديثة غير الرخيصة في الآونة الأخيرة. لكنهم يقدمون النتيجة الأكثر دقة.
العيوب: دقة منخفضة في التحليل مقارنة بالطرق التحليلية
طريقة Biuret لتحديد البروتين
البروتين في مصل الدم هو مؤشر يعكس حالة التوازن. تسمى الزيادة في تركيز المركب الجزيئي في الدم فرط بروتين الدم ، ويسمى المحتوى المنخفض بنقص بروتينات الدم.
بروتينات فيمصل الدم له تركيبة وبنية وخصائص مختلفة ويؤدي وظائف مختلفة. وهي مقسمة إلى إنزيمات وهرمونات وغلوبولين مناعي وغيرها. تحتوي جميع مجموعات البروتينات على عدد من الخصائص المشتركة ، والتي على أساسها تم تطوير طرق لتحديد المركبات العضوية الجزيئية في السوائل البيولوجية.
من بين جميع طرق الكيمياء الحيوية السريرية ، غالبًا ما تستخدم طرق قياس الألوان لتحديد البروتين. إنها رخيصة نسبيًا ، وهو أمر مهم لمنظمات الميزانية. وهي بسيطة للغاية. الطريقة الأكثر شيوعًا هي طريقة البيوريت. جوهر الطريقة: تتفاعل البروتينات في بيئة قلوية مع كبريتات النحاس وتشكل مركبات أرجوانية. يتم تحديد محتوى البروتين في الدم من خلال تشبع التلوين. يتم أخذ المواد الحيوية للتحليل في الصباح على معدة فارغة.
التحليل دقيق للغاية ولكن هناك عوامل تؤثر على تركيز البروتين في الدم:
- نشاط بدني قبل وقت قصير من أخذ عينات المواد الحيوية ؛
- الأسابيع الأخيرة من الحمل والرضاعة ؛
- استخدام عقاقير Corticotropin و Miscleron و Clofibrate يزيد من محتوى البروتين في الدم ، واستخدام Pyrazinamide و estrogen - لتقليل التركيز ؛
- وضع اليد الخطأ أثناء أخذ عينات المواد الحيوية.
تحديد الحديد
كمية الحديد في الدم من المؤشرات الرئيسية في تشخيص الأمراض المختلفة. تتركز المادة في الهيموجلوبين الذي يضمن نقل الأكسجين إلى الأنسجة. إلى عن علىتحديد الحديد بطريقة القياس اللوني ، في أغلب الأحيان ، يتم استخدام محلول باثوفينانثرولين (0.02٪) ككاشف رئيسي. المواد الحيوية - مصل بدون آثار لانحلال الدم
جوهر الطريقة: يشكل تفاعل الأيونات الحديدية و Bathophenanthroline الكبريت مركبًا ملونًا ، يتم تحديد تشبعه ضوئيًا. للحصول على حل واضح ، من الضروري اتباع القواعد الخاصة بأخذ عينات من المادة الحيوية ، ولكن لتحديد الكثافة البصرية لمجمعات ليجند الحديد بدقة ، يتم إطلاق الحديد من الهيموجلوبين باستخدام هيدروكسيلامين والمنظفات (كبريتات دوديسيل الصوديوم). تحدد نتيجة الاختبار وجود ودرجة علم الأمراض. يجب أن يكون تركيز الحديد الطبيعي:
- 14، 2 - 26.0 ميكرو مول / لتر (رجال) ؛
- 10، 6- 21، 7 ميكرو مول / لتر (للنساء).
يرتبط نقص الحديد عادة بفقدان الدم ، أو عدم كفاية المدخول الغذائي ، أو سوء الامتصاص من الجهاز الهضمي.
اختبار الكوليسترول
الكوليسترول مادة عضوية توجد في جدار الخلية للعديد من الكائنات الحية ، بما في ذلك البشر. وهو ضروري لإنتاج هرمونات الكولي كالسيفيرول والستيرويد. يعتبر مستوى الكوليسترول من 3.37-5.2 مليمول / لتر طبيعيًا. المحتوى المرتفع هو أحد الأسباب الرئيسية لتصلب الشرايين.
تسمح لك طرق القياس اللوني لتحديد الكوليسترول بالتعرف على أمراض الأوعية الدموية في مرحلة مبكرة. وفقًا للنتائج التشريحية المرضية للنتائج المميتة للإقفار ، فإن تركيز الكحول المحب للدهون في المرضىكان 6.5-7.8 مليمول / لتر.
مبدأ طريقة القياس اللوني هو أن الكوليسترول يتأكسد بواسطة 3beta-hydroxy-steroid oxidoreductase ، مما يطلق بيروكسيد الهيدروجين ، الذي يحول p-aminoatipyrine إلى مركب ملون. يتم تحديد محتوى الكوليسترول من خلال تشبع لونه.
عند إجراء اختبار على الطفل ، يجب مراعاة أن تركيز الكوليسترول في الطفولة يجب ألا يتجاوز 4.1 مليمول / لتر.
ما هي طريقة القياس اللوني الأنزيمية؟
تعتمد الاختبارات الأنزيمية على استخدام تفاعلات الإنزيمات ذات النشاط العالي. تستخدم على نطاق واسع في الكيمياء التحليلية لتحديد المواد المختلفة - من أيونات النترات إلى الجزيئات الكبيرة.
الأساليب الأنزيمية (الأنزيمية) محددة ، مما يسمح بتحليل بعض المواد في وجود مواد أخرى مماثلة في التركيب. أكثر الطرق شيوعًا التي تعتمد على استخدام الإنزيم - الجلوكوز أوكسيديز. يستخدم الاختبار لتحديد تركيز الجلوكوز في الدم. تسمح دقة الاختبار باستخدامه لضبط جرعة عوامل سكر الدم لدى مرضى السكري من النوع 2.
تعتبر طريقة أكسدة الجلوكوز من أفضل الطرق الكمية لتحديد مستوى الجلوكوز. يمكن استخدام كل من الدم (الشعيرات الدموية) والمصل كمواد حيوية ، ولكن يفضل استخدام البلازما لأنها تحتوي على نسبة أقل من الهيماتوكريت ، مما يؤثر سلبًا على دقة النتيجة.
يتم استخدام الطريقة الحركية للقياس الضوئي بشكل أساسي. يكمن جوهرها في حقيقة أنالنسبة المحددة من الجلوكوز أوكسيديز والبيروكسيديز ، لفترة زمنية معينة بعد بدء التفاعل ، فإن معدل تكوين مركب ملون سوف يتناسب مع مستوى الجلوكوز في العينة. الميزة الرئيسية للاختبار هي أن النتيجة لا تتأثر بوجود مركبات الطرف الثالث في العينة. الطريقة لها أيضًا عيب - أدوات قياس باهظة الثمن من الشركات المصنعة الألمانية أو السويدية مطلوبة للاختبار.
الخلاصة
طريقة القياس اللوني دقيقة وسهلة الاستخدام. يسمح استخدامه في الطب بالكشف المبكر عن التغيرات المرضية المختلفة في الجسم. مع إدخال التقنيات الجديدة ، يتم تحسين الطريقة وأصبحت أكثر شيوعًا.
